Он расположен в 130 км к северо-востоку от Москвы на туристическом маршруте «Золотое кольцо».
Общая площадь НП составляет 24149,11 га, в том числе водный фонд - акватория озера Плещеево – 5 098 га. Площадь земель лесного фонда – 16 614 га, дендрологический сад им. С.Ф.Харитонова на площади – 58 га.
Экологическим стержнем национального парка является озеро Плещеево – один из крупнейших и наиболее живописных водоемов Центральной России, который по ряду геоморфологических, гидрологических, гидрохимических и других показателей не имеет аналогов на Европейской территории России. В бассейне озера Плещеево современная флора представлена 790 видами растений, из них 84 вида крайне редких, нуждающихся в особой охране, 7 включены в Красную Книгу РФ, а 19 – в региональный список редких и исчезающих в центре Европейской части России видов.
Фауна близ озера Плещеево также достаточно богата. На территории парка обитают 300 видов позвоночных животных, в том числе около 60 видов млекопитающих, около 200 видов птиц, 10 видов пресмыкающихся и земноводных. Здесь есть уникальный комплекс бабочек. Всего в Красную Книгу бывшего СССР и РСФСР было внесено 10 видов насекомых, 2 вида рыб, 14 видов птиц, 3 вида млекопитающих, обитающих на территории национального парка.
Особое место в деятельности национального парка занимает рукотворный уголок – дендрологический сад им. С. Ф. Харитонова, который зарегистрирован в Международном каталоге ботанических садов Карлова университета (г. Прага). Уникальная коллекция древесно-кустарниковой растительности сада представлена более 600 видами интродуцированных с различных континентов растений.